forskare hävdar ett stort antal celler i laboratoriet för att lägga till vår förståelse av hur celler växer , föröka sig och dö . För att bibehålla cellerna , forskarna dela periodvis - subkultur eller split - dem i färskt odlingsmedium . Subkultur
Celler odlas suspenderas i tillväxtmedium eller fäst vid petriskålar av plast eller kolvar . När celler växer blir de tätare , använda upp näringsämnen och utsöndrar avfallsprodukter i mediet . Därför måste celler regelbundet uppdelad i mindre antal och ges färskt medium - . Vanligen vid ett visst antal celler per skål
Metod
Count och späd suspenderade celler i färskt medium . För bifogade celler , ta bort förbrukat medium och försiktigt tvätta cellerna med en saltlösning buffert . Exponera celler till ett enzym eller saltlösning för att bryta cell - cell-och cell - skålen anslutningar - trypsin används oftast . Stoppa den enzymatiska reaktionen med tillsats av djurserum , plats cell blanda i ett rör och snurra i en centrifug. Ta flytande , försiktigt återsuspendera cellerna i färskt medium , räkna och sprida dem på önskad täthet .
Överväganden
Subkultur celler i en steril miljö med steril utrustning för att undvika bakterie-eller svamp- kontaminering . Cell density , den tid i trypsin och subkultur frekvens är alla beroende på celltyp . Använd ett mikroskop för att regelbundet övervaka celler .
