Molekylärbiologer placera rutinmässigt fragment av DNA - plasmider - som innehåller gener av intresse i bakterier . Detta är ett enkelt sätt att replikera och producera mer av genen och /eller generera genens produkt , vilket kan bli något liknande insulin . Elektroporering
Elektroporering är en metod för att få plasmiden i bakterier . Bakterier och DNA blandas i ett rör och utsätts för ett elektriskt fält som produceras av en elektroporation maskin . Det elektriska fältet stansar små hål i bakterierna , vilket gör att DNA i cellerna. Bakterier som tar upp DNA mest effektivt är elektrokompetenta celler .
Metod
elektrokompetenta bakterier såsom E. coli kan produceras genom en serie av upprepade centrifugering , först till bort deras odlingsmedium och ersätta det med ultrarent vatten , och slutligen för att ersätta vattnet med glycerol . I de sista stegen bakterierna är suspenderade i en liten volym av glycerol , indelade i rör, fryses i flytande kväve och förvaras lång sikt i en -80 grader Celsius ( -112 grader Fahrenheit ) frys .
Överväganden
Detta protokoll görs vanligen med stora volymer som kräver stora kolvar , omrörare och centrifuger . Det är viktigt att de steg från skörd till lagring allt utföras vid iskalla temperaturer . Ultrarent vatten måste användas .
